紫丁香酚黃

① 刺五加葉子的成分

刺五加為五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus（.etMaxim）性Harms的乾燥根及根莖，莖、葉也可作葯用。刺五加商品名為五加參，是我國東北地區典型的葯用植物，味辛、微苦、性溫。無毒。主要分布在我國黑龍江、吉林、遼寧、河北等地。樹皮作五加皮入葯。刺五加具有益氣健脾、補腎安神、益精壯骨之功效。本草綱目稱刺五加為「本經上品」，能「補中益氣，堅筋骨強意志，久服輕身耐老」。刺五加全國年需求量500萬公斤以上，以刺五加為原料的中成葯種類繁多，如刺五加片、刺五加註射液。安神補腦膠囊、腦安片等；另外中醫處方對刺五加需求量也較大，使刺五加的市場供應日趨緊張。自50年代以來，以中醫葯理論為指導，在豐富的傳統用葯經驗的基礎上，從本草考證、資源分布、引種繁殖、生葯鑒定、化學成分、生化葯理、制劑生產及臨床等各方面進行了有計劃的研究工作。通過大量的研究和實驗，人們對刺五加的活性物質及其葯理作用做了深入研究。本文對其化學成分、葯理作用及提取分離簡述如下。

1、化學成分
1.1 苷類
刺五加根和根莖的主要成分為酚苷類化合物。實驗證明刺五加總苷是其生物活性成分之一。總苷在根和根莖中的含量分別占干葯材重量的0.6%～0.9%和0.6%～1.5%已分離出七種刺五加苷（A、B、C、D、E、F、G），分別為胡蘿卜苷（A），紫丁香酚苷（B），7-羥基-6，8-二甲基香豆精葡萄糖苷（B1），乙基半乳糖苷（C），紫丁香樹脂酚二糖苷（D和E）含量比例8:30:10:12:4:2:1。最新研究證明莖中刺五加苷B苷E的含量高於根部。2O世紀90年代初Kujawa等又從刺五加根的甲醇提取物中分離到兩種新皂苷。近些年對刺五加莖葉的研究不斷深入，從葉中分離得到齊墩果酸為配基的五加葉苷I、K、L和M等。而齊墩果酸被認為是我國目前首次從植物中發掘出來的治療急性黃疽性肝炎和慢性病毒性肝炎較理想的葯物，研究表明齊墩果酸也存在於刺五加莖皮中。20世紀80年代末Shao從葉中分得5種新皂苷，即刺五加苷A1、A2、A3、D3、A4。吳立軍等分得新的化合物刺五加酮（Ciwujiatongn）和新刺五加酚(necoiwujiaphenol），並首次分得阿魏葡萄苷（fereloylsucrose）。
l.2 多糖
刺五加多糖（Acathopanas senticosus Polysacharides，ASPS）包括葡萄糖、果糖、阿拉伯糖等，為免疫活性成分之一。刺五加含2%～6%鹼性多糖及2.3%～5.7%水溶性多糖。我國也從刺五加中提取出刺五加多糖PES，其中兩種多糖被命名PES-A和PES-B，分子量分別為7000和7600，PES-A的組成比，葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖-33:2:1，主要為1-3α-D-葡萄吡喃糖（Pyranoglucose）及一些1-2與1-4連接的吡喃型己醛糖。刺五加果中也含有與根多糖組成極為相似，也具有一定保肝作用的水溶性多糖。
1.3 微量元素及氨基酸
刺五加含有K、Na、Mg、Si等元素及Fe、B、Sr、Mn、Cu、Ni、Mo、Cr、Bi、Ti等多種微量元素。衛平等的分析結果表明短柄五加莖中含16種氨基酸，其中7種為人體必需的。
1.4 其它成分
趙余慶等從根皮中分離出硬脂酸、β谷甾醇、芝麻素白樺脂酸、苦杏仁苷。蔗糖以及具有促性腺和細胞素作用的活性成分Liriodenchin。從根和根皮的水提物中分得反式4,4'-二羥基-3，3-二甲氧基芪（trans-4，4'-dihydroxy-3，3，-dlmethoxystilene）和7-羥基-6，8-二甲基香豆素即異嗪皮啶（isoraxidin)。陳貌連等利用電噴霧質譜發現刺五加葉存在槲皮素苷（槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖），金絲桃苷（槲皮素-3-O-β-D-半乳糖），槲皮素和蘆丁（槲皮素-3-O-蘆丁糖）。除金絲桃苷外，其它3種為刺五加葉中尚未報道的黃酮類成分，經測定槲皮素及相關的黃酮昔類化合物在刺五加葉中含量達37.25%。

2、葯理作用
經過大量研究與實驗，表明刺五加可增強機體非特異性防循能力，除具有免疫調節、抗腫瘤。抗衰老、抗輻射、抗損傷及抗疲勞作用外，還可治療心腦血管疾病。糖尿病、神經衰弱等症。
2.1 增強免疫功能
刺五加多糖及有苷類成分均能明顯提高細胞產生誘生干擾素的能力，刺五加能增強網狀內質系統的吞噬能力和腹腔巨噬細胞的吞噬能力，提高玫瑰花結的百分率，多糖成分能明顯增加CTL殺傷靶細胞的活性，促進ConA（伴刀豆素A）刺激的小鼠脾細胞分泌白細胞介素-2。多糖具有多種生物活性，是理想的免疫增強劑，它能促進T細胞、B細胞、NK細胞、M細胞等細胞的功能，還能促進白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等細胞因子的產生。
2.2 抗疲勞作用
大鼠負重遊泳試驗及小鼠爬繩法試驗表明，刺五加提取物及苷類物質具有明顯的抗疲勞作用，其作用比人參強。同時證明本品苷的抗疲勞作用強於粗提物，說明抗疲勞的活性成分為苷類物質。
2.3 抗衰老作用
刺五加具有抗衰老作用，大鼠口服劑五加2個月後，細胞脂質氧化物含量降低，Na+-K+-ATP酶活性升高。本品乙醇提取物能延長小鼠結扎雙側頸總動脈或斷頭喘息的存活時間；能降低大鼠肝、腦中過氧化脂質的水平，提高血漿中SOD（超氧化物歧化酶）的活性，對缺血後再灌注腦內的過氧化脂質含量增加有保護作用。
2.4 抗菌、抗病毒作用
刺五加對白色葡萄球菌、奈瑟菌、大腸桿菌有一定的抑菌作用。多糖成分可增強豚鼠抗人型結核菌的能力。另外刺五加對蟬媒腦炎病毒感染也有抑製作用。但也有人報道刺五加提取物有提高腸道桿菌的能力。
2.5 抗輻射作用
刺五加能增加動物抵抗輻射的能力，能延長受輻射大鼠的生存時間，對紅細胞遭受放射樣物質侵害時有保護作用，對造血系統放射損傷後小鼠的細胞結構的恢復有促進作用。
2.6 抗應激作用
刺五加水浸膏及醇浸膏能增加小鼠對高溫和低溫的耐受力，可降低高溫或低溫應激刺激引起的小鼠死亡率。
2.7 抗腫瘤作用
刺五加的提取物對動物實驗性的移植瘤（肉瘤180、256、艾氏腹水癌等）葯物誘發瘤均有一定的抑製作用，同時能抑制癌瘤的轉移。實驗證實刺五加多糖對S180細胞磷脂醯肌醇（PI）轉換有顯著的抑製作用，其抑製作用與劑量呈正相關性，這可能是刺五加抑制腫瘤細胞增殖的作用機制之一。

3、提取分離
3.1 傳統迴流法
刺五加莖乾燥品5kg、75%迴流提取，提取回收乙醇，加適量蒸餾水稀釋後，脫脂棉濾過，經D101大孔樹脂，用水及不同濃度乙醇洗脫。其中20%乙醇洗脫部分（約63g）經硅膠柱色譜，以氯仿一甲醇梯度洗脫，分離純化得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ；50%乙醇洗脫部分（約30g），經硅膠柱色譜，以氯仿一甲醇梯度洗脫，分離純化得到化合物Ⅳ、Ⅴ，根據理化性質和譜學分析（H—NMR，13C－NMR），確定它們的結構，分別為香莘酸（I）、丁香酸（Ⅱ）、對羥基苯乙醇（Ⅲ）、異香萃醛（Ⅳ）、異秦皮啶（V）。丁香苷（ VI）。趙余慶等從刺五加的甲醇提取物中分得9種化合物分別鑒定為硬脂酸、芝麻素、β谷甾醇、胡蘿卜苷、白樺脂酸、丁香苷、苦杏仁苷、蔗糖和Lirioden－drin，其中硬脂酸、白樺脂酸、苦杏仁苷首次從該植物中得到。
3.2 微波提取
王娟等人採用連續微波輔射方式進行微波萃取工藝的優選，以總皂苷和異秦皮啶的含量指標，研究微波輔助萃取刺五加的提取工藝，研究結果表明該技術應用於中葯有效成分的提取是可行的。傳統迴流法所需的淀劑較微波萃取法多，且加熱時間為微波萃取法的24倍，雖然在微波萃取法中干浸膏得率較低，但對於我們所關注的指標成分異秦皮啶含量，卻比傳統方法高出2倍，總皂苷含量則略高一些。這主要是因為在加熱時間較長的情況下，原料中的澱粉、糖類等雜質溶出更多，從而導致比傳統加熱迴流法中干浸膏得率高些。在傳統加熱迴流方式中，熱量傳遞由外向內，而微波萃取中傳熱和傳質的方向均由內向外，因此微波萃取法更有利於有效物質的溶出。李芙蓉、呂博首運用微波技術從刺五加中提出刺五加多糖，並對其含量進行了測定，多糖含量為5.01%。
3.3 超聲提取法
李慶勇等人通過超聲波法提取刺五加根莖中丁香苷的試驗，確定最佳試驗條件為：水為溶劑，溶劑用量8ml/g，超聲提取20min，提取溫度為室溫。此法成本低，提取反應在常溫下進行，提取時間短，提取率也較高。用此法提取了香苷不僅簡便快捷，而且可靠性強。
3.4 色普技術
吳立軍等人利用各種色譜技術對刺五加莖葉化學成分進行分離純化，根據理化性質和光譜數據進行結構鑒定，得到3個化合物，分別鑒定為新刺五加酚、阿魏酸葡糖苷、香苷，阿魏酸葡糖苷為新化合物，香苷為自然界首次分離。
3.5 高效液相層析（HPLC）
劉麗春等人利用HPLC梯度洗脫法，同時測定刺五加註射液中刺五加苷B和刺五加苷E的含量，試驗證明此法快速、靈敏、准確。刺五加的化學成分及其葯理作用證明總苷及多糖為主要活性成分，現代科學技術將為刺五加的進一步研究提供廣闊的空間。